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一种新的三嵌合蛋白作为抗炭疽毒素的高免疫原性抗原:理论和实验分析

Abdous, M;Hasannia, S;Salmanian, AH;Shahryar Arab, S;Shali, A;Alizadeh, GA;Hajizadeh, A;Khafri, A;Mohseni, A;

炭疽热是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人畜共患疾病,可在6天内致命。为了开发更有效的兽药和人类炭疽疫苗,已经进行了大量的努力,因为这些常见的疫苗有几个局限性。炭疽杆菌分泌三种毒素,包括保护抗原(PA)、水肿因子(EF)和致死因子(LF)。多项研究表明PA在保护炭疽热方面具有重要作用。LF和EF也诱导产生毒素中和抗体。PA与LF/EF融合后具有协同作用,是一种潜在的亚单位疫苗。本研究首次利用modeler 9.19软件,将EF和LF的n端结构域和PA的c端结构域这三个炭疽毒性抗原的不同结构域融合为高免疫原性抗原,构建了一种名为ELP的三重嵌合蛋白模型。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和MTT法检测ELP在豚鼠体内的免疫原性。理论研究和分子动力学(MD)模拟结果表明,ELP模型具有良好的质量和稳定性。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析纯化的ELP,其结构域和PA与分子大小匹配,并通过western blotting分析确认。 In the immune guinea pigs, antibody was produced against all of the ELP domains. It was observed that ELP induced strong humoral response and could protect murine macrophage cell line (RAW 264.7 cells) against anthrax lethal toxin (LeTx). ELP chimeric antigen could be considered as a high immunogenic antigen.

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