引用

4216 总记录数 177 今年的记录

一个对肉毒杆菌毒素有反应的适体信标

布鲁诺,JG;理查特,AM;卡里略,MP;

从10轮筛选中开发了60个针对肉毒杆菌神经毒素(BoNT) A型轻链(LC)的候选DNA适配体,得到了几个相同的序列。将相同适配体的二级结构与先前报道的BoNT A DNA适配体的结构进行比较。从这个比较中选择了一系列十个候选环结构作为潜在的结合袋和适配体信标。这些候选信标是用5'-TYE 665和3'-Iowa Black淬灭器标签合成的,用于比较BoNT a LC浓度的荧光水平函数。10个候选基因中只有3个对BoNT A LC水平的增加有荧光反应。然而,在两个反应最灵敏的候选者中,一个代表了更大更强的荧光双环结构的子集环,被指定为Beacon 10。该信标在缓冲液中使用荧光光谱计和便携式手持荧光计的检测下限为1 ng/mL,但即使在稀释的土壤悬浮液中,也对BoNT a、B、E全毒素和重或轻链成分有显著响应,但在50%的人血清中不响应。Beacon 10对其他各种不同的多肽没有强烈反应,这表明它对肉毒杆菌毒素的水平是相对特异性的,只对环境测试有用。Beacon 10还与其他已发表的BoNT适配体DNA序列共享短序列片段,这表明这些可能是适配体和BoNT之间的物理接触点。伟德亚洲游戏室

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