引用

人肠上皮细胞系(T84、Caco-2和HCT-8)在可渗透Transwell过滤器上生长，可作为胃肠道屏障的模型。在这项研究中，评估了该体外模型系统在区分有害和非有害蛋白质方面的有效性。在接触有害或无害蛋白质后，监测细胞毒性指标(LDH释放、MTT转化)、单层屏障完整性([(3)H]-菊粉通量、辣根过氧化物酶通量、跨上皮电阻[TEER])和炎症(IL-8、IL-6释放)。检测的有害蛋白质包括链球菌溶解素O(来自化脓性链球菌)、艰难梭菌毒素A和B、产肠毒素大肠杆菌的不耐热毒素、李斯特菌溶解素O(来自单核增生李斯特菌)、蜂毒素(来自蜂毒)和mastoparan(来自黄蜂毒液)。无害蛋白质包括牛和猪血清白蛋白、牛纤维连接蛋白和菠菜中的二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisco)。食物致敏蛋白牛奶-乳球蛋白和花生Ara h 2也进行了测试，抗营养食品蛋白小麦胚芽凝集素也进行了测试。结果表明，该模型系统通过多种细胞系的联合分析和测定，有效地区分了危险蛋白和非危险蛋白。这种实验策略可能代表一个有用的辅助多组分分析蛋白质与未知的危险概况。