引用

炎性小体是先天免疫信号平台，是成功控制许多病原生物所必需的，但也会促进炎症和自身炎症性疾病。炎性小体被胞质模式识别受体激活，包括nod样受体(NLR)家族的成员。这些受体在检测到微生物或损伤相关刺激时寡聚。随后招募的适配器蛋白ASC形成一个显微镜可见的炎症小体复合体，通过近距离诱导的自动激活激活caspase-1。激活后，caspase-1裂解il -1和il -18，导致这些促炎细胞因子的激活和分泌。Caspase-1还介导称为焦亡的细胞死亡的炎症形式，其特征是膜完整性的丧失和细胞裂解。Caspase-1裂解gasdermin D，释放n端片段，形成质膜孔，导致渗透裂解。在体外，caspase-1的激活可以通过用caspase-1活性探针FAM-YVAD-FMK标记骨髓来源的巨噬细胞和用抗适配器蛋白ASC的抗体标记细胞来确定。该技术允许使用荧光显微镜识别单个细胞中的炎症小体形成和caspase-1激活。通过测量细胞溶质乳酸脱氢酶释放到培养基中，可以检测到焦性细胞死亡。 This procedure is simple, cost effective and performed in a 96-well plate format, allowing adaptation for screening. In this manuscript, we show that activation of the NLRP3 inflammasome by nigericin leads to the co-localization of the adaptor protein ASC and active caspase-1, leading to pyroptosis.