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4072 总记录号 36 今年记录

针对志贺毒素2的单克隆抗体的开发和表征及其在牛奶中的毒素检测

He,X; McMahon,S; Skinner,C; Merrill,P; Scotcher,Mc; Stanker,LH;

产生大肠杆菌(STEC)的志贺毒素的人类感染是最普遍的食源性疾病之一。Shiga毒素2型(STX2)是导致溶血性尿毒综合征(HUS)的主要因素和STEC引起的其他系统并发症。尽管由于乳制品的消费量,HUS暴发经常发生,但很少有关于牛奶中STX2检测的测定的报告。在这项研究中,我们使用重组毒素作为免疫原来描述五种高亲和力单克隆抗体(NM低于NM范围的解离常数)对STX2的发展。这些抗体,指定为STX2-1,STX2-2,STX2-3,STX2-4和STX2-5是IgG1或IgG2A与Kappa轻链的重链子子类,并未与STX1交叉反应,并且表现出对不同的偏好STX2的变体。蛋白质印迹分析表明,mAbs stx2-2和stx2-5均结合了a-和b-subunits,而其他3个mAb仅结合STX2A的A-亚基。除MAB STX2-3外,所有抗体与天然结合的固定性比变性的STX2A更强,该抗体与两种形式的毒素形式均良好结合。在这五个mAb中,STX2-5能够中和Vero细胞中的STX2A介导的细胞毒性。使用MAB Pair Pair Pair STX2-1和STX2-2开发了高度敏感的ELISA和免疫PCR分析,能够在牛奶中检测1和0.01 pg/ml的STX2A。 Such assays are useful for routine diagnosis of Stx2 contamination in milk production process, thus reducing the risk of STEC outbreaks.

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