引用

艰难梭菌产生两种主要的毒力毒素，毒素A (TcdA)和毒素B (TcdB)。抗毒素抗体，特别是中和抗体，已被证明与较低的艰难梭菌感染(CDI)复发发生率相关，抗体水平可预测无症状定殖。开发一种检测动物和人类血清中中和抗体的检测方法，以评估疫苗的效力是非常需要的。我们已经开发了这样一种检测方法，可以自动量化毒素对真核细胞的影响。我们在这里描述了这种测定方法的优化，以测量毒素效力以及中和抗体(NAb)对艰难梭菌毒素使用设计实验(DOE)方法的活性。利用Vero细胞对毒素浓度和来源、细胞播种密度和血清毒素预培养时间进行了优化。该测定被证明是稳健的，并在抗体浓度范围内产生线性结果。它可以用来量化艰难梭菌类毒素疫苗免疫的猴子和仓鼠血清中的中和抗体。该实验被证明与传统的实验密切相关，传统的实验依赖于劳动密集型的方法，通过中毒细胞单层的视觉显微镜检查来确定中和抗体滴度。该方法可用于艰难梭菌疫苗候选株的筛选和优化。