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用分离度和纯度不同的LPS制剂刺激RAW264.7巨噬细胞的基因表达谱

拉特里奇,HR;蒋,W;杨,J;瓦格,LA;施瓦茨,DA;

脂多糖是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分,通过TLR4有效刺激先天免疫反应。在体内和体外对LPS作用的研究使用了不同的LPS制剂,包括超纯LPS (LIST)和从大肠杆菌血清型O111:B4中分离出来的纯度较低但价格较低的形式(Sigma)。虽然这些信息对理解TLR刺激很重要,但这些化合物之间的作用差异还没有得到很好的研究。在这项研究中,我们比较了LIST或Sigma LPS处理6小时和24小时后RAW264.7巨噬细胞的反应。分析了基因表达数据,以确定两种LPS制剂中共同和独特的特定基因和通路。Sigma LPS处理后6小时,755个基因表达差异,LIST LPS处理后973个基因表达差异,其中503个基因相同。24 h时,Sigma LPS诱导或抑制901个基因,而LIST LPS处理差异调控1646个基因;两种LPS共有701个基因。尽管在对LIST LPS的反应中有相当多的基因表达差异,但相似的分子通路和转录网络被两种LPS制剂激活。我们还用不同浓度的LIST和Sigma LPS处理了来自三种小鼠的骨髓来源的巨噬细胞(BMMs),结果表明,在低LPS浓度下,BMMs对LIST LPS产生了更多的IL-6和TNF-,但在较高LPS浓度下,Sigma LPS刺激产生了更多的细胞因子。总之,这些发现表明,尽管LIST和Sigma LPS制剂激活了相似的分子通路,但Sigma LPS制剂中残留的蛋白质杂质仍可能影响归因于TLR4刺激的转录谱。

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