引用

视网膜神经节细胞(RGCs)接受来自双极细胞的兴奋性谷氨酸输入。RGCs的突触兴奋由NMDA受体(NMDARs)和AMPA受体(AMPARs)在突触后介导。生理数据表明，谷氨酸受体在RGCs不仅表达在突触后，也表达在突触周围或突触外膜室。然而，谷氨酸受体在RGC突触上的精确解剖位置尚未确定。虽然中央突触谷氨酸受体的高分辨率定量分析被广泛应用，但这种方法在视网膜上只取得了有限的成功。我们开发了一种用于膜受体分析的包埋后免疫金方法，使得估计视网膜带状突触上这些受体的数量、密度和变异性成为可能。在这里，我们描述了所需的工具，试剂和实际步骤:1)视网膜固定的成功制备，2)冷冻替代，3)包膜后免疫金电子显微镜(EM)免疫细胞化学，4)带状突触上谷氨酸受体的定量可视化。