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本生烟草瞬态过表达系统为快速和可扩展的生物制药生产提供了独特的优势，包括高可扩展性和真核翻译后修饰，如n -糖基化。糖蛋白抗原的高甘露糖型聚糖(HMGs)与一些亚单位疫苗的有效性有关。特别是Man9GlcNAc2(Man9)对甘露糖特异性c型凝集素受体(如甘露糖受体和树突状细胞特异性细胞内粘附分子3-抓取非整合素(DC-SIGN))具有很高的结合亲和力。在这里，我们研究了kifunensine，一种-甘露糖苷酶I抑制剂，在n的水培培养中补充的效果。利用n -糖基化霍乱毒素B亚单位(gCTB)和人类免疫缺陷病毒gp120，以H/KDEL内质网保留信号标记作为模型疫苗抗原，生产富含man9的HMG糖蛋白。使用抗焦抗体和抗木糖抗体以及Endo H和PNGase F消化的生化分析表明，kifunensine处理有效地减少了gCTB植物特异性糖型，同时增加了gCTB then聚糖组成中的HMGs。详细的聚糖谱显示，植物生产的gp120的聚糖谱主要含有HMGs，而不受kifunensine处理的影响。然而，在基富恩碱处理条件下产生的gp120显示Man9是最突出的糖型(64.5%)，而没有基富恩碱产生的蛋白的Man9成分明显较低(20.3%)。我们的研究结果为在植物中高效生产高甘露糖基化重组疫苗抗原开辟了可能性。