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日本传统发酵大豆纳豆提取物中多功能阳离子多肽的鉴定与表征

谷口,M;相田,R;齐藤,K;御斋,A;竹野,S;

在本研究中,我们研究了来自传统日本发酵产品纳豆的阳离子肽的脂多糖(LPS)中和和血管生成活性。纳豆是用枯草芽孢杆菌发酵熟大豆制成的。首先,我们用无两性电解质等电聚焦(自动聚焦)方法制备了20个具有不同等电点的纳豆提取物馏分。用反相高效液相色谱法从pH值大于12的馏分19和20中纯化阳离子多肽,并用基质辅助激光/解吸电离-飞行时间质谱法进行鉴定。在鉴定的13个阳离子肽中,有7个(KFNKYGR, FPFPRPPHQK, GQSSRPQDRHQK, QRFDQRSPQ, ERQFPFPRPPHQK, GEIPRPRPRPQHPE, EQPRPIPFPRPQPR) pI大于9.5,带正电荷,分子量不同。然后,这些肽被化学合成,并使用鲎试剂溶出物应用于显色lps中和试验,结果表明,50%的有效(中和)浓度为2.6-5.5 M。此外,在人脐静脉内皮细胞中形成管的实验显示,除了geiprprprprqhpe外,这7种阳离子肽都具有血管生成活性,在10 M时肽的存在下,相对管长增加了23-31%。后续实验显示,在哺乳动物红细胞中,当浓度达到500 M时,这些肽的溶血活性可以忽略。总的来说,这些数据表明,除了GEIPRPRPRPQHPE外,纳豆提取物中的6个阳离子肽具有lps中和和血管生成活性,但不诱导溶血。版权所有2018年日本生物技术学会。版权所有由爱思唯尔出版。

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