引用

在体外观察致命的炭疽外毒素通过缩小尺寸的纳米孔转移的能力，结合详细的序列和结构数据，有助于阐明外毒素进入细胞和毒性的机制。然而，由于炭疽外毒素在体外通过保护抗原纳米孔转移的观察有限，以及保护抗原功能化悬浮脂双分子层的不稳定性，关于细胞进入的原生机制仍然存在问题。纳米多孔水凝胶膜为研究蛋白质易位提供了一种强大的工具，它可以作为传统单分子易位测量的补充。在这里，我们利用纳米多孔水凝胶膜来评估炭疽致死因子和水肿因子通过与保护抗原转位直径相似的纳米孔的转运。我们发现，相对于球状血清和其他不能通过纳米孔进行天然转运的蛋白质，炭疽外毒素明显减少了孔进入的障碍。计算得到的蛋白质展开和大分子络合物解离的自由能垒通常被发现与易位相一致。最后，开发了一种纳米孔阻断策略，该策略利用非特异性合成肽结构，有效地防止了LF在纳米孔水凝胶中的易位。