引用

越来越多的基于抗体的疗法正在被考虑用于控制细菌感染，包括通过靶向毒素A和b来控制艰难梭菌。为了开发新的艰难梭菌免疫疗法，我们之前分离了几种单域抗体(VHHs)，能够通过识别极端c端组合重复寡肽(CROPs)结构域来中和毒素A。但未能识别结合毒素B上相似区域的中和VHHs。在此，我们报告分离出一组29个VHHs，这些VHHs针对毒素B免疫原上至少7个独特的表位，这些表位由部分中央传递域和整个CROPs域组成。尽管单价亲和度高达KD = 70 pM，但没有一种vhs测试能够中和毒素B;然而，在VHH-VHH二聚体中观察到适度的毒素B抑制作用，在VHH-Fc融合中观察到更大程度的抑制作用，在体外实验中达到了最近批准的抗毒素B单克隆抗体bezlotoxumab的中和效力。表位结合显示，一些VHH-Fcs在不同于bezlotoxumab识别区域的位点结合毒素B，而其他VHH-Fcs部分与bezlotoxumab竞争毒素结合。因此，本文所描述的VHHs通过在与bezlotoxumab结合位点相似或不同的区域靶向毒素B，在格式为二价VHH-Fc融合时，可以有效中和毒素B。