引用

霍乱弧菌是一种革兰氏阴性细菌，是大流行性霍乱的病原体。先前的研究表明，第七次大流行El Tor生物型霍乱弧菌菌株N16961的存活需要在富含葡萄糖的环境中产生乙酰丙酮。乙酰乙素是一种中性发酵最终产物，它的产生使霍乱弧菌代谢葡萄糖而不产生pH值下降，这是由有机酸的产生介导的。这一发现表明，在富含葡萄糖的条件下，抑制乙酰乙素发酵可导致pH不平衡，从而消除霍乱弧菌。在这里，我们开发了一种简单的高通量筛选方法，并确定了培养基酸化诱导物(iMAC)。在筛选的8364个化合物中，我们鉴定出一种化学物质，5-(4-氯-2-硝基苯甲酰)-6-羟基-1,3-二甲基嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮，通过诱导酸性胁迫成功杀死葡萄糖代谢N16961。当N16961在iMAC的存在下与丰富的葡萄糖一起生长时，乙酰胺的产生被完全抑制，同时观察到乳酸和乙酸盐的积累。通过单拷贝palsD::lacZ报告基因融合的β -半乳糖苷酶活性测定，我们发现iMAC可能在转录水平上抑制乙酰乙酮的产生。薄层色谱显示，iMAC导致细胞内(p)ppGpp的积累显著减少，这是一种细菌严格反应，已知可积极调节乙酰乙酮的产生。iMAC治疗后，小鼠体内细菌定植和积液也明显减少。 Finally, we demonstrate iMAC-induced bacterial killing for 22 different V. cholerae strains belonging to diverse serotypes. Together, our results suggest that iMAC, acting as a metabolic modulator, has strong potential as a novel antibacterial agent for treatment against cholera.