引用

质周17千吨蛋白(Skp)伴侣蛋白的特征主要在于它在外膜蛋白(OMP)生物发生中的作用，在此过程中，水母样三聚体蛋白包裹部分折叠的OMP，保护它们免受水环境的影响，直到传递到BAM外膜蛋白插入复合物。然而，Skp越来越被认为是一种伴侣蛋白，它也有助于折叠细菌周质中的可溶性蛋白质。在这种能力下，Skp共表达增加了许多重组蛋白和细菌毒力因子的活性产量。使用一组具有不同稳定性和生物物理特性的单链抗体和单链t细胞受体(统称为scFvs)，我们在Skp存在或不存在的情况下进行了体内表达和体外折叠和聚集实验。对于Skp敏感的scFvs，在体外重折叠实验中Skp的存在减少了聚集，但没有改变观察到的折叠率，导致活性蛋白的总体产量更高。在所分析的蛋白质中，所有测定中的Skp敏感性都与折叠中间产物的存在相关，正如尿素变性研究所观察到的那样。这些结果与Skp作为一个保持酶，隔离部分折叠的中间产物，从而防止聚集一致。因为不是所有的可溶性蛋白质都对Skp共表达敏感，我们假设存在一种长寿命的蛋白质折叠中间体使蛋白质对Skp敏感。提高对细菌质周蛋白折叠机制的理解可能有助于高水平重组蛋白的表达，并可能有助于确定阻止细菌毒性的新方法。