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了解参数调节基因转移在3 d将协助基因传递系统和支架的形成,可以协调高效的病毒性交付指导体内组织再生和治疗。我们曾展示了细胞面积和长度,整合素的表达,RhoGTPase介导信号是关键参数,指导基因转移小鼠间充质干细胞(mMSCs)在二维培养和ECM调制的蛋白质。在这项研究中,我们感兴趣的是确定阳离子聚合物介导基因转移细胞的3 d通过不同机制会发生在二维相比播种。特别是,我们检查了内吞作用通路用于内化polyplexes,以及细胞骨架动力学的作用和RhoGTPases病毒性基因转移在2 d和3 d细胞播种。网格蛋白,抑制caveolae-mediated内吞作用导致更剧烈的减少总体转基因表达细胞播种比的二维三维。此外,polyplex内化只是显著减少在3 d clathrin-mediated内吞作用被抑制,而caveolae-mediated内吞作用抑制了细胞的二维导致polyplex内化最强的抑制。肌动蛋白和微管聚合影响2 d和3 d转染不同。在二维微管解聚作用增强的转基因表达,但在3 d抑制转基因表达。最后,抑制RhoGTPases 2 d和3 d影响转染的方式也不同。岩石的抑制效应物导致减少转基因表达和内化在3 d细胞播种,但不是在2 d,抑制效应PAK1导致增加的2 d和3 d的转基因表达。 Overall, our study suggests that the process of gene transfer occurs through different mechanisms for cells seeded in 2-D compared to those seeded in 3-D.