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使用显型微阵列来确定诱导或抑制艰难梭菌和其他微生物产生毒素的培养条件

雷,徐辉;

毒素的产生是艰难梭菌和许多其他病原微生物的发病机制的中心问题。毒素的合成受到遗传、生理和环境等多种已知和未知因素的影响。为了促进艰难梭菌毒素生产的研究,我们开发了一种新的、可靠的、定量的和可靠的基于细胞的细胞毒性测定方法。然后,我们将这种新的检测方法与表型微阵列(PM)技术相结合,该技术提供了培养条件的高通量测试。这使我们能够定量测量艰难梭菌型菌株ATCC 9689在768培养条件下的毒素生产。培养条件包括不同的碳源、氮源、磷源和硫源。其中89个条件产生强毒素诱导,31个条件产生强毒素抑制。强毒素诱导剂包括腺嘌呤、鸟苷、精氨酸二肽、-D-Glu-Gly、甲胺等。一些亮氨酸二肽和三亮氨酸三肽是最强的毒素抑制物。虽然一些结果与以前的观察结果一致,但其他一些结果是新的观察结果,为艰难梭菌的毒素调节和发病机制提供了见解。 Additionally, we have demonstrated that this combined assay technology can be applied broadly to a wide range of toxin producing microorganisms. This study is the first demonstration of simultaneous assessment of a large number of culture conditions influencing bacterial toxin production. The new functional cytotoxin quantitation method developed provides a valuable tool for studying toxigenic microorganisms and may also find applications in clinical and epidemiological research.

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