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经验证的MALDI-TOF-MS方法为炭疽致死因子的早期诊断和治疗评估提供了依据

加列戈斯-坎德拉,M;博耶,AE;伍尔菲特,AR;布鲁姆洛,J;林斯,RC;奎因,CP;霍夫马斯特,AR;

炭疽致死因子(Anthrax lethal factor, LF)是一种锌依赖性内蛋白酶,是炭疽病原菌炭疽芽孢杆菌的关键毒力因子。质谱(MS)法定量总lf包括三个步骤;1) LF特异性抗体捕获/浓缩,2)LF特异性肽底物水解,3)通过同位素稀释MALDI-TOF/MS检测和定量LF裂解肽。重组LF加标血浆用于校准和质量控制(QC)材料。对383例非感染者、31只兔子和24只恒河猴的血清和血浆进行分析,特异性为100%。32例人类临床炭疽病例,包括吸入、摄入、皮肤和注射感染,以及29只兔子和24只恒河猴的吸入性炭疽的实验性感染,敏感性为100%。稳健性评价包括样品储存、血清和血浆、抗菌和抗毒素效果和长期性能。来自100个独立试验的数据显示,4小时法的检测限为0.01 ng/mL (111 amol/mL),替代20小时法的检测限为0.0027 ng/mL (30 amol/mL)。QC精度范围为7.7 ~ 14.8%变异系数,精度范围为0.2 ~ 9.8%误差。经验证的LF质谱方法提供了炭疽总LF的敏感定量,使用一个强大的高通量平台,用于炭疽紧急情况下的早期诊断和治疗评估。

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