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列表实验室开发的新的炭疽致死因子检测方法

2018年2月20日

作者:douano@www.291q.com

作者:R&D主任Nancy Shine,List Labs的主任

ASM Biothreats 2018的炭疽LF检测海报演示

南希·闪闪(Nancy Shine)在2018年2月在ASM Biothreats展示她的海报

快速,敏感,特定和准确的检测方法,以确定通过炭疽芽孢杆菌在血浆中已开发列出生物实验室

炭疽芽孢杆菌被认为是主要的生物战威胁。吸入形式炭疽芽孢杆菌感染会迅速杀死。虽然抗生素治疗可以清除宿主的细菌,但如果诊断延迟,则迅速产生的毒素可能已经存在致命量。迫切需要快速,准确,敏感和简单的测定法,以确定是否发生了感染,从而允许立即治疗。

炭疽检测方法

炭疽致死因素(LF)在感染的早期,血液中存在于血液中。由于存在其他蛋白酶以及底物非特异性切割的可能性,因此在血浆中使用肽底物是有问题的。荧光标记的肽底物,Mapkkide Plus,产品#532,它不会被血浆蛋白酶裂解,因此已设计为LF。使用LF抗体涂层的微滴定板从血浆中捕获LF,然后将捕获的LF暴露于荧光底物。通过HPLC确定裂解肽底物的量,并通过荧光检测确定。使用抗体涂层板的LF浓度可以在2小时孵育后检测5 pg lf/ml的纯血浆。或者,使用荧光微孔板读取器,可以直接添加Mapkkide Plus通过荧光增加随时间的函数来监测的稀释血浆和裂解。消化5小时后,通过这种简单方法的检测极限为1 ng lf/ml血浆。可以通过分析反应作为时间的函数来确认这两种方法。这些方法在海报中描述使用特定的生物素化荧光底物对血浆中炭疽致死因子的敏感检测。

炭疽检测方法的下一步

我们目前正在使用Mapkkide Plus的生物素化形式,以使用荧光板读取器而不是HPLC来增强更简单方法的灵敏度。

你可以看到海报这里。要查看所有列表实验室海报的完整列表博客文章

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